유전자 클로닝과 DNA 분석

유전자 DNA 재조합 기술을 통한 클로닝은 특정 DNA을 떼어내 다른 DNA(벡터)에 결합시켜, 대장균(E.coli)같은 숙주에서 증식시켜 유전자 집단을 생성하는 기술을 의미한다.

이때, 벡터는 자기 복제가 가능해 대량으로 얻기가 쉬우며, 기본적으로 대장균을 사용하는 게 기본이다.

유전자를 얻기 위해서는 첫번째로, Genbank에서 자기가 원하는 염기서열을 분석하는 것이다.

이후, DNA를 역 PCR, RT-PCR으로 RNA을 분리 후 전기영동 시키며, gene 클로닝을 위해 유전자를 벡터에 삽입한다.

이때, DNA ligation으로 DNA를 붙이며, 제한 효소와 T 벡터로 클로닝을 위한 PCR을 진행한다.

그 후, 형질전환(Transformation)과 항생 처리 후, DNA를 세포로 삽입시키며, 플라스미드 DNA를 분리한 다음 제한효소 맵핑이나, DNA 시퀀싱을 하며, 제대로 클로닝이 되었는지 확인한다.