미생물의 생장 측정

미생물의 생장 측정법에는 대표적으로 현미경 측정법이 있다

현미경 측정법은 현미경으로 관찰해 미생물의 세포 수를 확인하는 것이며 결과의 신뢰도가 낮을 수 있다

이의 한계는 특별한 염색없이 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 없는 것이다

또한 작은 세포들은 간과하고 세지 못할 가능성과 정확성을 얻기 힘들다

염색법을 미사용시 위상차 현미경을 사용해야하며 낮은 밀도(<10^6 Cells/mL)에서의 세포 현탁액은 세기가 어렵다

또한 움직이는 세포는 고정해야하며 시료 내 불순물을 세포로 오인할 가능성도 있다

액체 시료 속 세포 수 측정 방법 2번째로 유동 세포 계수기(Flow cytometer)가 있다

이는 레이저빔, 형광 염색약, 전자 장치를 사용하는 정교한 방법이다

생균수 계산법(Viable cell counts, Plate counts)은 살아있으며 증식하는 개체군의 수를 측정하는 방법인데 도말 평판법(Spread plate method)와 주입 평판법(Pour plate method)가 있다

(도말 평판법과 주입 평판법에 대한 것은 아래 링크에서 자세히 확인할 수 있다

2016/04/26 - [미생물학] - 미생물의 고체표면 배지에서 순수 분리방법 3가지)

이는 적절한 집락 수를 위해 희석해야한다

현미경으로 직접 자연 시료의 세포 수를 측정하면 평판 내 재생할 수 있는 수보다 훨씬 많은 개체가 나타나는 것은 평판법의 불규칙성(The great plate count anomaly) 때문이다

이는 현미경 사용시 죽은 세포를 세는 반면 생균수 계산법과는 다르며, 다른 개체는 생장에 필요한 조건이 매우 다를 수 있기 때문에 발생한다

혼탁도 측정법(Turbidity)는 미생물 생장을 측정하는 간접적이고 빠른 유용한 방법이다

Spectrophotometer 원리

(이미지 출처 : http://classes.midlandstech.edu/carterp/courses/bio225/chap06/06-20_Turbidity_1.jpg)

분광 광도계(Spectrophotometer)와 흡광도(O.D, Optical density)로 측정하는데 이로 수행하기 쉽고 빠르며, 시료의 파괴와 훼손이 일어나지 않는다

다만, 문제 발생으로 액체 배지 내 미생물이 덩어리나 생물막을 형성할 수 있기에 주의를 해야한다